Principles of the Flow Cytometry Techniques
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La cytométrie en flux permet l’analyse quantitative et multiparamétrique de cellules en suspension dans un mélange hétérogène par entraînement dans un flux liquide.
Les cellules, alignées les unes derrière les autres, défilent à grande vitesse devant une source lumineuse. Il y alors émission de multiples signaux lumineux spécifiques à chaque cellule qui sont transformés en signaux électriques puis digitalisés pour être analysés de manière statistique.

Paramètres mesurés :
La Taille (diffusion de la lumière dans l’axe) : FSC (Forward Scatter)
La Granularité/Structure (diffusion de la lumière à 90°) : SSC (Side Scatter)
Le Phénotype cellulaire : Molécules de surface, protéines intracellulaires, contenu en ADN, etc…
(Intensité de Fluorescence relative émise à 90°) : FL1-2-3…
Principales applications :
Analyses morphologiques (Taille & granulositée)
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Analyses antigéniques :

Analyses fonctionnelles : * Protéines * Acides Nucléïques
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Managers
Scientific Responsible : Julien CHERFILS, Mail :
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Technical Responsible : Ludovic CERVERA, Mail :
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Telephone : 04 93 37 70 34 or 04 93 37 70 19
Equipment
* FacsCalibur Becton Dickinson
Analyseur 6 paramètres, 4 couleurs avec passeur de plaques

* FacsCanto Becton Dickinson
Analyseur 8 paramètres, 6 couleurs, lasers 488 nm et 633 nm avec carrousel 40 tubes

* FacsAria 3 Becton Dickinson
Analyseur trieur, 20 paramètres, 18 couleurs, 5 lasers (375 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm et 633 nm

The next new equipment to be installed :
* a BioSorter
Analyseur trieur multicellulaire pour matériel biologique de 1 à 1500 microm

Publications
Some publications issued of the Cytometry Core Facility :
Gambaro K, Aberdam E, Virolle T, Aberdam D and Rouleau M. BMP-4 induces a Smad-dependent apoptotic cell death of mouse emryonic stem cell-derived neural precursors. Cell Death Differ. 2006, 13 : 1075-87. Epub 2005 Nov 25
Luci C, C Hervouet, D Rousseau, J Holmgren, C Czerkinsky and F Anjuère. Dendritic cell-mediated induction of cytotoxic responses following intravaginal immunization with the non-toxic B subunit of cholera toxin. J. Immunol. 2006, 176: 2749-2757.
Jacquel A, Colosetti P, Grosso S, Belhacene N, Puissant A, Marchetti S, Breittmayer JP, Auberger P. Apoptosis and erythroid differentiation triggered by Bcr-Abl inhibitors in CML cell lines are fully distinguishable processes that exhibit different sensitivity to caspase inhibition. Oncogene. 2007 ; 26:2445-58.
Ben Sahra I, Laurent K, Loubat A, Giorgetti-Peraldi S, Colosetti P, Auberger P, Tanti JF, Le Marchand-Brustel Y, Bost F. The antidiabetic drug metformin exerts an antitumoral effect in vitro and in vivo through a decrease of cyclin D1 level. Oncogene. 2008, 27:3576-86
Griessinger E, Frelin C, Cuburu N, Imbert V, Dageville C, Hummelsberger M, Sirvent N, Dreano M, Peyron JF. Preclinical targeting of NF-kappaB and FLT3 pathways in AML cells. Leukemia, 2008.
Wakkach A, Augier S, Breittmayer JP, Blin-Wakkach C, Carle GF.Characterization of IL-10-secreting T cells derived from regulatory CD4+CD25+ cells by the TIRC7 surface marker. J Immunol. 2008, 180:6054-63.
Giuliano S., Cheli Y., Ohanna M., Bonet C., Beuret L., Bille K., Loubat A., Hofman V., Hofman P., Ponzio G., Bahadoran Ph., Ballotti R., Bertolotto C. Microphthalmia-associated transcription factor controls the DNA damage response and a lineage-specific senescence pogram in melanomas. Cancer Res., 2010, 70, 3813-3822.
(2012)
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IRCANCytometry Core Facility Medical School 5th Floor 28 Av de Valombrose06107 NICE Cedex 02 France Tel : +33 (0)4 93 37 70 34
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