Plateforme d'Imagerie Cellulaire et Moléculaire PICMI - AFM


Présentation


Présentation de la Plateforme de Microscopie à Force Atomique (AFM)


La Microscopie à Force Atomique (AFM) est une technique de microscopie à sonde locale qui permet d’étudier la topographie d'une surface. Une pointe très fine (2 à 20 nm à son extrémité), supportée par un microlevier, balaye l'échantillon. La pointe qui est très proche de la surface subit de la part de celle-ci une force attractive ou répulsive selon la distance pointe-surface mesurée par la déviation du levier. Une image tridimensionnelle de la surface est ainsi restituée sous une haute résolution grâce à la détection de ces forces interatomiques entre la pointe et l'échantillon.


Le service de microscopie à force atomique est intégré dans la Plateforme d’Imagerie Cellulaire et Moléculaire de l’IRCAN (PICMI).

 

Mai 2016

Responsables


Responsables scientifiques :



Cedric Gaggioli ( This e-mail address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it )



Sabrina Pisano ( This e-mail address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it )



 


Responsable administratif :


Nadine Fédou (nadine.fedou This e-mail address is being protected from spambots. You need JavaScript enabled to view it )


Equipement


Equipements


La Plateforme est équipée avec les appareils suivants :


- Multimode 8 (Bruker)

pour une microscopie AFM à très haute résolution, dédiée à l’étude des échantillons de petite taille (ADN, ARN, protéines).


Il permet d'utiliser plusieurs modes opératoires (contact, tapping, peak force tapping) dans l’air et en milieu liquide.

Cet AFM a trois différents scanners utilisés en fonction de la dimension de l’échantillon :

-      0.4μm x 0.4μm XY and 0.4μm Z

-      10μm x 10μm XY and 2.5μm Z

-      125μm x 125μm XY and 5μm Z


- Bioscope Catalyst (Bruker)

pour l’étude d’échantillons de taille plus importante (chromosomes en métaphase, cellules, tissus).



Il permet d'utiliser plusieurs modes opératoires (contact, tapping, peak force tapping) dans l’air et en milieu liquide.

Scanner disponible ~ 150μm XY, ~ 20μm Z.

Cet AFM est posé sur un microscope optique inversé Leica Microsystems DMI 6000B (Fond clair, Contraste de phase, Epifluorescence) pour permettre la définition de la zone d’intérêt et plus généralement le couplage des techniques. Il a la possibilité de travailler dans un environnement liquide contrôlé (en température et en composition).


Les deux équipements permettent à la fois la caractérisation topographique et l'analyse des propriétés mécaniques de l'échantillon.

Quelques Echantillons

Quelques Echantillons



              a)         b)    


              c)

a) plasmidic DNA

b) nucleosomal array reconstituted in vitro

c) different multimeric complexes of the telomeric TRF2 protein:

each dimer wraps 90 bp of DNA, producing an apparent

shortening of DNA if compared with the length of the naked DNA


                                 

a)                                             b)                               c)

a) Example of superimposition of optical and AFM topographic images of a fibroblast cell

b) and c) Quantitative mechanical properties maps, modulus and deformation

respectively obtained simultaneously to the topographic image


                  

a)                                                     b)                                          c)


a) Optical image of the area of a murine skin slice scanned by AFM

b) Mechanical map of the same area

c) 3D topographical image of the area of interest


Charte AFM


Charte AFM à télécharger